YAP (D8H1X) XP ® Rabbit mAb

产品使用信息

为了获得的 ChIP 和 ChIP-seq 结果,每次免疫沉淀使用 10 μl 抗体和 10 μg 染色质(大约 4 x 106 个细胞)。该抗体已使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits 进行了验证。

使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 测定 CUT&RUN 使用稀释比。

应用	稀释度
蛋白质印迹法	1:1000
免疫沉淀法	1:50
IHC-Leica® Bond™	1:100 - 1:400
免疫组织化学(石蜡)	1:200 - 1:800
免疫荧光法(免疫细胞化学)	1:50 - 1:200
流式细胞术	1:50 - 1:200
染色质免疫沉淀法	1:50
ChIP-seq	1:50
CUT&RUN	1:50

保存

保存在 10 mM sodium HEPES (pH 7.5)、150 mM NaCl、100 μg/ml BSA、50% 甘油和低于 0.02% 的中。-20℃ 保存。切勿分装抗体。

特异性/灵敏度

YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 可识别内源水平的总 YAP 蛋白。

物种反应性:

人, 小鼠, 大鼠, 仓鼠 , 猴

基于 99% 序列同源性预测发生反应的物种:

牛 , 马, 豚鼠

来源/纯化

使用对人 YAP 蛋白的羧基末端具有特异性的重组蛋白,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。表位对应人 YAP 同工型 1 的 Pro435 周围的区域。在人 YAP 蛋白的所有已知同工型中,该序列区域具有 99% 的保守性。

背景

YAP(Yes 相关蛋白,YAP65)的鉴定基于其与 Yes 的 SH3 域结合的能力。它还结合其他包含 SH3 结构域的蛋白,如 Nck、Crk、Src 和 Abl (1)。除了 SH3 结合基序,YAP 还有一个 PDZ 互作基序、一个卷曲螺旋结构域和许多 WW 结构域 (2-4)。YAP 的初步研究都指出,它在锚定和靶向特定亚细胞区室中发挥作用。后续研究表明,YAP 是一个转录共激活蛋白,因为其 WW 结构域与转录因子 PEBP2 和其他转录因子的 PY 基序 (PPxY) 相互作用 (5)。作为一个转录共激活蛋白,YAP 现在被广泛认为是 Hippo 通路的一个介导物,从而在组织生长和器官大小的调节中发挥功能性和广泛保守的作用 (6-8)。LATS 激酶磷酸化许多位点(如 Ser109 和 Ser127)会促进 YAP 从细胞核转位到细胞浆,从而通过结合 14-3-3 蛋白被隔离 (7-9)。这些 LATS 诱导的磷酸化活动能让 YAP 进一步被邻近磷酸降解决定子中的 CK1δ/ε 磷酸化,从而诱发 YAP 蛋白酶体降解 (10)。

1. Sudol, M. (1994) Oncogene 9, 2145-52.
2. Mohler, P.J. et al. (1999) J Cell Biol 147, 879-90.
3. Espanel, X. and Sudol, M. (2001) J Biol Chem 276, 14514-23.
4. Sudol, M. et al. (1995) FEBS Lett 369, 67-71.
5. Yagi, R. et al. (1999) EMBO J 18, 2551-62.
6. Dong, J. et al. (2007) Cell 130, 1120-33.
7. Zhao, B. et al. (2010) Genes Dev 24, 862-74.
8. Zhao, B. et al. (2007) Genes Dev 21, 2747-61.
9. Yu, F.X. et al. (2012) Cell 150, 780-91.
10. Zhao, B. et al. (2010) Genes Dev 24, 72-85.