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人elisa试剂盒是常用于生物医学研究的工具

更新时间:2024-01-03

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  人elisa试剂盒是常用于生物医学研究和临床诊断的实验工具,其原理基于酶联免疫吸附实验,抗体是免疫系统产生的蛋白质分子,可以识别并结合特定的抗原,形成抗原-抗体复合物。Elisa试剂盒通常包含有特异性与目标抗原结合的抗体。分为直接Elisa、间接Elisa、竞争Elisa和间接竞争Elisa等多种类型。
 
  人elisa试剂盒的步骤如下:
 
  1.固定抗原:在试验板表面上固定抗原。通常将抗原溶液加入试验孔并孵育,使抗原与试验板表面结合。
 
  2.阻断:通过加入一种非特异性蛋白(如牛血清蛋白)来封闭试验孔表面的未被固定的地方,以防止非特异性结合。
 
  3.添加样品:加入含有可能存在目标抗原的样品,样品中的目标抗原与试板上的固定抗原结合。
 
  4.洗涤:洗涤试板以去除非特异性结合的蛋白质和其他杂质。
 
  5.加入初级抗体:加入与目标抗原结合的初级抗体。初级抗体可以是直接标记的,也可以是未标记的。
 
  6.洗涤:洗涤试板以去除未结合的初级抗体。
 
  7.加入二级抗体:加入与初级抗体结合的二级抗体。二级抗体一般是与酶结合的抗体,如辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)标记的抗体。
 
  8.洗涤:洗涤试板以去除未结合的二级抗体。
 
  9.加入底物:加入一种酶底物,通常为染色底物。该底物可以与酶发生反应,产生可见的颜色变化。
 
  10.反应终止:加入酶反应终止剂,停止底物的反应,并保留底物的颜色变化。
 
  11.测量:使用光谱仪或读板仪器测量试验孔中底物的颜色强度,该强度与目标抗原的浓度相关。
 
  通过测量底物的颜色强度,可以确定样品中目标抗原的含量。人elisa试剂盒的灵敏度高,可以检测低浓度的抗原,并具有分析简单、高通量的优点,因此被广泛应用于医学诊断和科学研究领域。