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细胞培养如何防止污染?

更新时间:2022-12-05

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   除特殊要求外,建议培养基中添加双抗比较好。防止污染这件事,真的没有那么简单,常规操作就不赘述了,主要安利一下我们实验室自己总结的防污染tips:
  1,从培养箱取放细胞前,用酒精清洁双手(或手套),尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
  2,操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前,准备好所有实验所需物品,以减少走动,物品需有序摆放在超净台触手可及的地方,同时空留足够操作空间。
  3,操作时,试剂不用尽量及时盖上盖子,移至操作区外围,尽量不要从开口容器上经过。
  4,使用移液枪时,将容器倾斜以便于移液,切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况,要及时用酒精棉球擦拭,以免液体残留导致细菌滋生。
  5,先取试剂、耗材,再取移液枪、安装。很多人习惯先安装,然后去拿试剂、耗材,殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。
  6,向废液缸打废液时,需轻柔,以免造成水花四溅,污染枪头、枪体。实验结束,及时倒掉废液缸垃圾,冲洗之后喷洒酒精,放入超净台紫外照射杀菌。
  7,冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时,从液氮罐取出冻存管,轻拧盖子,以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处,在37度水浴锅中快速解冻,水面不可超过冻存管盖沿;不建议直接扔进水中,以免水渗入造成污染。其实就算再严格,也有被污染的可能,但是总的来说,防患未然比亡羊补牢强得多,还有就是,操作过程中,对于那种模糊不清的、你不确定的有没有污染的,宁愿认为是有菌的弃掉!也不要心存侥幸!