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PI细胞周期可能有四种命运

更新时间:2022-10-22

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  PI细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。细胞周期是一个重要的检测参数,研究细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。
 
  PI细胞周期检测步骤:
 
  1.细胞样品的准备:
 
  收集细胞,用1ml预冷PBS洗1遍,轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
 
  2.细胞固定:
 
  加入1ml预冷的70%乙醇中,轻轻吹打混匀,4度固定2小时或更长时间(固定12-24小时可能效果更佳)。1000g离心3-5分钟,沉淀细胞(如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或加大离心力)。弃上清,用用1ml预冷PBS洗1遍。
 
  3.PI染色:
 
  每个样品用0.5ml染色缓冲液(或PBS)重悬,加入25ulPI染色液(20×)、10ulRNaseA(50×)。37度避光温浴30分钟。
 
  4.流式检测:
 
  用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光,同时检测光散射情况。采用分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
 
  PI细胞周期可能有四种命运:
 
  ①细胞经M期又开始第二次周期;
 
  ②停止于G2期,称为G2期细胞(R2),它受某种刺激后可进入周期;
 
  ③停止在G1期,称为休止细胞或G0期细胞,这类细胞受某种刺激后仍能进入周期,继续进行有丝分裂;
 
  ④丧失生命力近于死亡的细胞,称为丢失细胞,或称不再分裂的细胞。继续分裂的细胞沿着细胞周期从一个有丝分裂期到下一个分裂期。不再分裂的细胞离开了细胞周期不再分裂,终死亡。