LNA探针助力miRNA ISH检测

目前针对miRNA研究，已经有很完整的体系，小优也多次的对miRNA研究的其他技术进行多次讲解，本期是针对细胞水平miRNAs的定位研究--原位杂交（ISH）的介绍哦~

原位杂交技术（in situhybridization）是以标记的核酸分子为探针，在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。

图注：miRNA原位杂交示意图。左侧为ISH在细胞/组织水平上的步骤，右侧是分子水平上的步骤。红色和绿点代表荧光团，正方形代表非荧光配体。黑色的十字架表示miRNA的固定化。

在最早的ISH中，通常使用由DNA或RNA核苷酸组成的探针。未经修饰的DNA和RNA探针对目标序列的结合亲和力相对较差，因此有人提出了一些修饰来改善它们的性质，最早也是经典的修饰就是LNA修饰，这仍然是RNA FISH的金标准。

图注：LNA结构图

miRCURY LNA miRNA Detection Probe为经典的LNA修饰miRNA ISH检测探针，除此之外，对mRNA和lncRNA的检测也有很大的帮助哦~
LNA探针已经成功的使用在多种样本类型中（图3），包括whole mount，单细胞，冷冻切片及FFPE组织样本等。

miRNA detection in FFPE

miRNA detection in zebrafish.

miRNA detection in chick.

LNA探针还可以用于核酸和蛋白的共定位，荧光标记的探针与IHC同时进行，更简单获得鲜明的结果哦~

Dual stain in normal mammary gland by ISH and (IHC) in a double-fluorescence assay.

Dual stain in ductal carcinoma in situ (DCIS) by ISH and  (IHC) in a double-fluorescence assay.

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